Determinación del sexo en Drosophila
Implica la interacción de una serie de genes. Cada uno de estos genes tendrá un splicing diferencial, cuyo producto influirá sobre el siguiente gen de la cascada génica, determinado así el sexo. Todo depende de la relación entre cromosomas sexuales y autosomas. El primer gen que se ve influido por este proceso es el gen sex – lethal, que posee 7 exones, pero en el 3 hay un codón de stop. En hembras se provoca un splicing alternativo que provoca que se elimine ese exón de la proteína final. Por lo tanto, en machos no hay proteína funcional, pero en hembras sí será funcional y influirá en el siguiente splicing. El siguiente gen del proceso es el transformer, donde podemos encontrar 4 exones, con un codón de stop en el segundo. Debido a la proteína Sxl, producida por el gen sex – lethal, se inhibe el splicing normal y se activa un splicing alternativo, en un lugar críptico, que eliminará el codón de stop. En hembras habrá una proteína resultante de este proceso, mientras que en machos la proteína no será funcional. El producto, Tra, influirá sobre el gen siguiente, el transformer 2, donde pasará aproximadamente como en el caso anterior. Estos 2 último productos influirá en la expresión del último gen, que es el doublesex, que posee 6 exones, con un codón stop en el cuarto. El Tra y el Tra2 son factores de splicing que provocan que el splicing en hembras se haga de manera normal, de manera que se pasará por el codón de stop del cuarto exón. En machos se eliminará el exón con el codón stop, con lo que la proteína será más larga. La proteína Dsx de las hembras elimina la expresión de los genes de los machos, mientras que las proteínas Dsx de los machos bloquean los genes de las hembras. La proteína Sxl impide que U2AF se una en el punto normal del intrón por lo que lo hace en el interior del exón, con lo que se provoca el splicing alternativo. Las proteínas Tra y Tra2 interaccionan con las proteínas SR. Sin estas proteínas se da un splicing que elimina el exón 4. En presencia de estas proteínas SR, el exón no es eliminado. El lugar donde se unen las proteínas Tra se conoce como splicing enhancer.
PROCESOS DE MADURACIÓN
El resultado de la acción de la RNA polimerasa II es un RNA heterogéneo, o transcrito primario. Este transcrito deberá pasar por un proceso de maduración antes de ser el producto definitivo. Capping El RNA maduro eucariota necesita un capping en el extremo 5’. Consiste en la adición del 7 metilguanilato en el extremo 5’ de la cadena, impidiendo así que haya extremos 5’ libres en la cadena. Actúan una serie de enzimas, como la guaninil transferasa, que añade el guanilato; la guanil – 7 – metil transferasa, que metila el guanilato en la posición 7; y por último, la 2’ – O – metil transferasa, que es capaz de metila grupos en posición 2’ O. El capping es necesario para iniciar la traducción, ya que sin capping, no se podrá traducir. Se cree que el capping puede influir en el transporte del RNA y que además le puede proteger contra una posible degradación. Poli A LA mayoría del RNA eucariota tienen una cola de 20 a 200 As, que no están codificadas por la secuencia de DNA, sino que se añaden después. Para que se produzca la adición de A es necesaria la presencia de una secuencia concreta, que es la señal AATAAA, en el DNA. Está situado entre 10 y 30 pb de distancia de CA, donde se producirá el corte. Se ha visto que existen zonas de GTGT a 10 – 30 pb en dirección de CA, en dirección 3’. Hacen falta una serie de factores para que se produzca la adición de poli A.
• CFI y CFII ( Cleavage factor): son los factores que tienen actividad endonucleasa y permiten cortar el RNA. • CPSF ( Clevage poly adenilation stimulating factor): reconocerá la secuencia AAUAAA. • CstF: Se une a la región rica en GU. • Poli A polimerasa: sintetia la cola de poli A. • PAB (poly A binding protein): provoca que se de la adición de A a la secuencia de RNA. Si mutase la secuencia AATAAA, no se produciría la cola de poli A, a la ve que tampoco se podría producir una correcta terminación de la transcripción. No se producirá una correcta terminación si la polimerasa no pasa por la señal de poli A. Es posible que sea debido a algún factor antiterminador, unido a la polimerasa, que al pasar por esta señal se liberase. Es posible tambien que la polimerasa no tenga antiterminador, sino que funcione sin él, lo que provocaría que una parte de los transcritos que se sintetizasen fuesen incompletos. Se cree posible que el factor antiterminador pueda ser el TFIIS.
